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關于人類精子庫,精子冷凍保存會影響精子質(zhì)量嗎?

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關于人類精子庫,精子冷凍保存會影響精子質(zhì)量嗎?

人類精子庫(human sperm bank)是關于利用超低溫冷凍保存等技術,采集、人類檢測、精庫精冷精質(zhì)保存和外供人類精子用于治療不育癥、凍保提供生殖保險,影響并進行相關研究的關于機構(gòu)。“人類精子庫”概念的人類提出歷史久遠。

關于人類精子庫,精子冷凍保存會影響精子質(zhì)量嗎?

四川省人類精子庫

四川省人類精子庫

精子庫的精庫精冷精質(zhì)歷史

1776年

意大利著名生物學Spallanzani發(fā)現(xiàn)冰雪凍存的精子經(jīng)復溫處理能有部分精子存活。

1886年

Mouteyazza發(fā)現(xiàn)在低于-15℃時人類精子能夠生存,凍保并首次提出了“精子庫”的影響概念。

1949年

Polge等發(fā)現(xiàn)甘油具有良好的關于細胞冷凍保護特性,使這一設想成為可能。

1954年

Bunge和Sherman報道采用保存于干冰中(-78℃)的人類人類精子解凍后人工授精獲得成功。

1963年

Sherman優(yōu)化了精液的精庫精冷精質(zhì)冷凍方法,將精液冷凍儲存于液氮(-196℃)獲得理想效果,凍保至此,影響人類精子庫技術平臺基本形成。

1973年

10年間全世界約有1000例用冷凍精液人工授精出生的嬰兒,人類精子庫已發(fā)展成為常規(guī)的臨床服務機構(gòu)。

1981年

原湖南醫(yī)學院(現(xiàn)中南大學)盧光琇等建立了我國第一家人類精子庫。

1986年

原國家計劃生育委員會科學技術研究所(現(xiàn)國家衛(wèi)生和計育生委員會科學技術研究所)陳振文承擔了國家計生委重點項目“人類精子超低溫冷凍保存技術的研究和人類精子庫的建立”,并在WHO的培訓和資助下建立了人類精子庫,其目的在于開展生殖保險,為輸精管絕育志愿者解除后顧之憂。此外,青島、山東、上海等地也相繼建立了人類精子庫, 并將人類精子庫的精液用于供精人工授精。

2001年

原衛(wèi)生部(現(xiàn)國家衛(wèi)生和計劃生育委員會)頒布《人類輔助生殖技術管理辦法》和《人類精子庫管理辦法》,同年5月14日以衛(wèi)科教發(fā)〔2001〕143號發(fā)布了《人類輔助生殖技術規(guī)范》、《人類精子庫基本標準》、《人類精子庫技術規(guī)范》和《實施人類輔助生殖技術的倫理原則》。

精子庫

精子庫靠志愿者募集

精子冷凍保存

精子冷凍保存是人類精子庫的核心技術內(nèi)容。

成功的精子冷凍保存要求在解凍后保持精子結(jié)構(gòu)和功能的完整性。為了保證正常的體內(nèi)、體外受精能力,精子的細胞器必須在冷凍和解凍過程中得到保護,特別是頂體、鞭毛和中段等結(jié)構(gòu)。

然而,這些細胞器對冷凍損傷(例如滲透壓)的敏感性是不同的。有時候,當精子活動率得到很好保護時,或許頂體的完整性卻受到了嚴重的損傷。因此,設置理想的冷凍解凍流程在某種程度上是一門平衡的藝術。

目前待解決的問題:如何提高冷凍技術,進一步減少冷凍對精子的損傷,提高精子冷凍復蘇率?

1、對精子活動能力的影響

冷凍可導致精子運動能力受損,實驗結(jié)果顯示,冷凍后精子的活動率會下降。不同樣本、不同冷凍方法,其冷凍復蘇率不同。

Oberoi等(2014)證實正常精液冷凍解凍后,精子的活動率會從86%下降到63%。Araki等(2015)采用微囊單精子冷凍,解凍后冷凍復蘇率在78%左右。Stein等(2015)采用冷凍環(huán)冷凍嚴重少弱精子癥精子(每環(huán)10~20個精子),93%的樣本在解凍后至少能找到一個活動精子。Saeednia等(2015)采用正常精液精子進行冷凍,解凍后的冷凍復蘇率為82%。

精子庫限制條款多而復雜

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2、頂體損傷

冷凍可導致精子頂體的損傷,頂體損傷程度直接影響冷凍精子的受精能力。冷凍后部分精子會出現(xiàn)頂體腫脹及破損。頂體損傷主要發(fā)生于解凍時,嚴重時可致精子死亡。與新鮮精子相比,冷凍精子獲能及頂體反應提前。

3、精子質(zhì)膜損傷

冷凍和解凍過程可導致精子質(zhì)膜受損,進而損害精子的運動能力。膜損傷的程度可以通過測定細胞膜不飽和脂肪酸的脂類過氧化值(lipid peroxidation,LPO)確定。

4、DNA損傷

冷凍和解凍過程可引起精子DNA損傷。

Spano等(1999)使用吖啶橙對精子頭進行DNA染色,發(fā)現(xiàn)冷凍后精子頭熒光強度下降,表明精子DNA的完整性受損。Chohan等(2004)進一步證實上述結(jié)果,同時發(fā)現(xiàn)不同個體精子DNA在冷凍后的損傷程度不同,因個體差異,部分個體的精子DNA更易因冷凍受損。

有研究報道,當DNA受損的精子超過30%時精子無法正常受精,因此,Chohan等(2004)建議在使用冷凍精液進行人工授精前應檢測精子DNA的損害程度。

人類精子庫同時面向健康人群和男性不育患者兩個群體,應當承擔男性生殖遺傳資源的保存、開發(fā)和利用的研究任務。

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